細胞增殖檢測服務(wù)

應(yīng)用領(lǐng)域

MTT比色法能定量檢測細胞的增殖與生長。已經(jīng)在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的許多研究領(lǐng)域中用于檢測細胞毒性、細胞活性和細胞增殖試驗。

收費標(biāo)準

服務(wù)周期

我公司在正式接受實驗委托5~6周左右完成實驗并交付實驗結(jié)果。

客戶須知（對材料的要求、注意事項）

1.客戶須在實驗開始前確保其提供材料的數(shù)量和質(zhì)量，并提供相關(guān)信息：

樣本的介紹；

相關(guān)實驗設(shè)計內(nèi)容如藥物處理時間、樣本濃度等。

2.本公司在收到客戶提供的研究材料后的弟二個工作日起開始實驗。

服務(wù)程序

1.可在我公司網(wǎng)站內(nèi)直接填寫《細胞增殖檢測服務(wù)訂單》發(fā)至我公司郵箱。

2.可下載訂單，填寫完成后，用傳真的形式發(fā)到我公司。

3.可電話聯(lián)系詳談有關(guān)具體要求和服務(wù)內(nèi)容。

4.簽訂《細胞增殖檢測服務(wù)合同》，預(yù)付實驗總費用的50%作為實驗預(yù)付款。

5.寄送：委托單位的試驗材料和試劑等均須采用te快專遞形式郵寄，有低溫要求的、固定要求的，按低溫保存、固定防碎方法運輸，以確保實驗物品的安可靠。

6.實驗結(jié)束后，本公司將結(jié)果及時發(fā)給客戶，同時根據(jù)客戶要求處理相關(guān)材料：

原始數(shù)據(jù)；

實驗報告（包括實驗流程，材料和方法等）。

7.客戶應(yīng)對所提供的材料及信息負責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經(jīng)濟損失由客戶承擔(dān)。

服務(wù)咨詢及技術(shù)支持

電話:

Email:SLBY800@163.COM

服務(wù)項目簡介

MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞內(nèi)線粒體中的琥珀酸脫氫酶能催化外源性無色的MTT形成藍色的結(jié)晶Formazan，并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的Formazan，用酶聯(lián)免疫檢測儀在一定波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細胞數(shù)成正比。

該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗、以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經(jīng)濟。

技術(shù)步驟

1.接種細胞：收集對數(shù)期細胞，調(diào)整細胞懸液濃度，每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調(diào)密度至1000~10000孔，邊緣孔用無菌PBS填充。

2.細胞培養(yǎng)：5% CO2，37℃孵育，至細胞單層鋪滿孔底（96孔平底板）。

3.藥物處理：加入濃度梯度的藥物，原則上，細胞貼壁后即可加藥，或兩小時，或半天時間，但我們常在前一天下午鋪板，次日上午加藥.一般5~7個梯度，每孔100ul，設(shè)3~5個復(fù)孔。

4.呈色：5% CO2，37℃孵育16~48小時，倒置顯微鏡下觀察。每孔加入20ul MTT溶液（5mg/ml，即0.5% MTT），繼續(xù)培養(yǎng)4h。若藥物與MTT能夠反應(yīng)，可先離心后棄去培養(yǎng)液，小心用PBS沖2~3遍后，再加入含MTT的培養(yǎng)液。

5.溶解：終止培養(yǎng)，小心吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液。對于懸浮細胞需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加入150ul二甲基亞砜，置搖床上低速振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。

6.比色：在酶聯(lián)免疫檢測儀OD490nm處測量各孔的吸光值，記錄結(jié)果，以時間為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，繪制細胞生長曲線。同時設(shè)置調(diào)零孔（培養(yǎng)基、MTT、二甲基亞砜），對照孔（細胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、二甲基亞砜）。

應(yīng)用實例

FAQ（Frequently Asked Questions）

1. 藥品的詳細信息可以保密嗎？

可以，只需要提供給我們藥物的分子量等必需信息。

2. 網(wǎng)站上的價格：4000元/樣品，指的是每用一種藥物處理5株細胞的價格，還是每用一種藥物處理1株的價格？

指的是每用一種藥物處理5株細胞的價格,詳細情況請來電咨詢。

3. 貴公司的細胞增殖檢測服務(wù)只能用MTT法檢測嗎？能否用其他檢測方法？

用MTT法，也可以用其他方法，價錢另計。

4. 藥物檢測時，每種細胞株的一般采用幾個平行？對照又是怎么處理的，以及相應(yīng)采用幾個平行？

藥物實驗每個濃度一般做3個平行，對照也保證有一定的復(fù)孔數(shù)。