在不限制性消化的情況下產(chǎn)生無縫質(zhì)粒DNA或BAC克隆

Gibson組裝過程從設計末端重疊20-40bp的dsDNA片段開始。對于Gibson Assembly HiFi 1步反應，這些DNA片段與2X Gibson Assembly?HiFi 1步主混合物結合并孵化。在這段時間內(nèi)，互補端被生成、退火和密封。這個一步恒溫過程可以在不到60分鐘的時間內(nèi)完成，并產(chǎn)生一個轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)化準備好的、雙鏈、完全連接的DNA結構。

GA一步主混合物（2X）包含一種酶和試劑的專有混合物，優(yōu)化后可促進雙鏈DNA片段的一步組裝。該mastermix包括一個校對多聚酶，它介導連接修復，以低連接錯誤率和高序列保真度得到組裝結構。本產(chǎn)品不包括Gibson Assembly?HiFi一步法套件中的GA陽性對照品。如果您是Gibson Assembly的新手，或者需要對您的實驗進行驗證的陽性對照，則可能需要考慮目錄號GA1100-S、GA1100-10或GA1100-50。

Gibson組裝方法允許在幾乎任何載體中插入一個或多個線性雙鏈DNA片段，而無需依賴兼容的限制性位點。Gibson組裝法

在不限制性消化的情況下產(chǎn)生無縫質(zhì)粒DNA或BAC克隆

Gibson組裝過程從設計末端重疊20-40bp的dsDNA片段開始。對于Gibson Assembly HiFi 1步反應，這些DNA片段與2X Gibson Assembly?HiFi 1步主混合物結合并孵化。在這段時間內(nèi)，互補端被生成、退火和密封。這個一步恒溫過程可以在不到60分鐘的時間內(nèi)完成，并產(chǎn)生一個轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)化準備好的、雙鏈、完全連接的DNA結構。

GA一步主混合物（2X）包含一種酶和試劑的專有混合物，優(yōu)化后可促進雙鏈DNA片段的一步組裝。該mastermix包括一個校對多聚酶，它介導連接修復，以低連接錯誤率和高序列保真度得到組裝結構。本產(chǎn)品不包括Gibson Assembly?HiFi一步法套件中的GA陽性對照品。如果您是Gibson Assembly的新手，或者需要對您的實驗進行驗證的陽性對照，則可能需要考慮目錄號GA1100-S、GA1100-10或GA1100-50。

Gibson組裝方法允許在幾乎任何載體中插入一個或多個線性雙鏈DNA片段，而無需依賴兼容的限制性位點。Gibson組裝法明顯快于傳統(tǒng)的基于限制性內(nèi)切酶消化的克隆法，并被證明可以同時克隆小片段和大片段的雙鏈DNA。使用Gibson Assembly?HiFi一步主混音，可以在一個單管中一步完成一到五個大小從500 bp到32kb的插入物的同時克隆，使用穩(wěn)健的等溫反應，克隆效率大于90%。

訂購信息：提供支持10或50個反應的主混合物。主混合物作為一小瓶GA 1級主混合物（2X）提供，并附有詳細的說明手冊。請注意，本產(chǎn)品不包括Gibson Assembly?HiFi一步法套件中的GA陽性對照品。如果您是Gibson Assembly的新手，或者需要對您的實驗進行驗證的陽性對照，則可能需要考慮目錄號GA1100-S、GA1100-10或GA1100-50。