Gibson組裝由Dr

開發(fā)，它允許成功組裝多個(gè)DNA片段，無論片段長度或末端相容性如何。合成生物群落由于其易用性、靈活性和適合于大DNA構(gòu)建而迅速被采用。Gibson組裝在單管等溫反應(yīng)中有效地連接多個(gè)重疊的DNA片段。吉布森組裝主混合物包括在單個(gè)緩沖液中執(zhí)行的三種不同酶活性：1）外切酶產(chǎn)生單鏈3'懸鏈，有助于在一端（重疊區(qū)域）共享互補(bǔ)性片段的退火。2） 聚合酶填補(bǔ)了每個(gè)退火片段中的空白。3） DNA連接酶在組裝好的DNA上封住缺口。最終的結(jié)果是一個(gè)雙鏈完全密封的DNA分子，可以作為PCR、RCA或其他各種分子生物學(xué)應(yīng)用的模板，包括直接轉(zhuǎn)化。吉布森小組和其他人已經(jīng)成功地利用這種方法組裝寡核苷酸、具有不同重疊（15-80bp）的DNA和數(shù)百個(gè)千堿基長的片段。

Daniel Gibson和他在J.Craig Venter Institute的同事，由合成基因組公司授權(quán)給NEB。

Gibson組裝由Dr

開發(fā)，它允許成功組裝多個(gè)DNA片段，無論片段長度或末端相容性如何。合成生物群落由于其易用性、靈活性和適合于大DNA構(gòu)建而迅速被采用。Gibson組裝在單管等溫反應(yīng)中有效地連接多個(gè)重疊的DNA片段。吉布森組裝主混合物包括在單個(gè)緩沖液中執(zhí)行的三種不同酶活性：1）外切酶產(chǎn)生單鏈3'懸鏈，有助于在一端（重疊區(qū)域）共享互補(bǔ)性片段的退火。2） 聚合酶填補(bǔ)了每個(gè)退火片段中的空白。3） DNA連接酶在組裝好的DNA上封住缺口。最終的結(jié)果是一個(gè)雙鏈完全密封的DNA分子，可以作為PCR、RCA或其他各種分子生物學(xué)應(yīng)用的模板，包括直接轉(zhuǎn)化。吉布森小組和其他人已經(jīng)成功地利用這種方法組裝寡核苷酸、具有不同重疊（15-80bp）的DNA和數(shù)百個(gè)千堿基長的片段。

Daniel Gibson和他在J.Craig Venter Institute的同事，由合成基因組公司授權(quán)給NEB。