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酶聯(lián)免疫(ELISA)服務(wù) 世聯(lián)博研生命科學(xué)服務(wù)中心提供酶聯(lián)免疫(ELISA)服務(wù)。ELISA是繼免疫熒光和放射免疫之后又一具有重大意義和深遠(yuǎn)影響的免疫技術(shù)。該技術(shù)利用蛋 白和聚苯乙烯表面疏水吸附的特性,將抗原-抗體te異性反應(yīng)固定于固相載體表面進(jìn)行,同時(shí)結(jié)合酶對(duì)底物的高效催化作用產(chǎn)生高靈 敏度的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。由于酶的高效生物催化作用,一個(gè)酶分子在數(shù)分鐘內(nèi)可以催化幾十或幾百個(gè)底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生了放大效應(yīng) ,使得原來(lái)微乎其微的抗原或抗體在數(shù)分鐘后就可被檢測(cè)出來(lái),因此可成功應(yīng)用于標(biāo)本中微量物質(zhì)含量的測(cè)定。 客戶須知(對(duì)材料的要求、注意事項(xiàng)) 1.液態(tài)類標(biāo)本(細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等); 2.樣本量:每個(gè)樣本收集體積=120ul*檢測(cè)指標(biāo)數(shù); 3.樣本保存:請(qǐng)盡早檢測(cè),2-8℃保存一天;需更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號(hào)后,置-20℃或-70℃保存; 4.請(qǐng)?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬(人、大鼠、小鼠、兔、豬等)、樣本數(shù)量、待測(cè)指標(biāo)。 在收集標(biāo)本前必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。具體操作注意事項(xiàng)請(qǐng)與我司技術(shù)人員溝通。 服務(wù)周期 1~2周左右,視樣本量而定。 收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn) 組織樣本蛋白提取定量80元/ 樣;300元/單次檢測(cè) 公司可代購(gòu)客戶所需要的ELISA試劑盒,費(fèi)用另計(jì),也可由客戶自行提供,請(qǐng)來(lái)電詳詢。 服務(wù)程序 1.可在我公司網(wǎng)站內(nèi)直接填寫(xiě)《酶聯(lián)免疫(ELISA)服務(wù)訂單》發(fā)至我公司郵箱。 2.可下載訂單,填寫(xiě)完成后,用傳真的形式發(fā)到我公司。 3.可電話聯(lián)系詳談?dòng)嘘P(guān)具體要求和服務(wù)內(nèi)容。 4.簽訂《酶聯(lián)免疫(ELISA)服務(wù)合同》,預(yù)付實(shí)驗(yàn)總費(fèi)用的50%作為實(shí)驗(yàn)預(yù)付款。 5.寄送:委托單位的試驗(yàn)材料和試劑等均須采用te快專遞形式郵寄,有低溫要求的、固定要求的,按低溫保存、固定防碎方法運(yùn)輸,以確保實(shí)驗(yàn)物品的安可靠。 6.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,本公司將以下結(jié)果及時(shí)發(fā)給客戶,同時(shí)根據(jù)客戶要求處理相關(guān)材料: ·實(shí)驗(yàn)方法、步驟、所用試劑、儀器等。 ·實(shí)驗(yàn)結(jié)果將以電子或書(shū)面形式提交給您。 服務(wù)咨詢及技術(shù)支持 ·電話: ·Email:slby800@163.com 服務(wù)項(xiàng)目簡(jiǎn)介 ELISA 的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗 原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶 的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起 反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物 質(zhì)分開(kāi)。 再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反 應(yīng)的底物后,底物被酶催化 成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。 由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè) 定方法達(dá)到很高的敏感度。
技術(shù)步驟 雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原常用的方法,以此為例,總體操作步驟如下: 1)將te異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。 2)加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。 3)加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。 4)加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過(guò)比色,測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。 應(yīng)用領(lǐng)域 適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。 FAQ(Frequently Asked Questions) 1. 可用作ELISA實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本有哪些? 可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。 2. ELISA實(shí)驗(yàn)中加樣有哪些需要注意的地方? 在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并 注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染, 也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在 板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1 min以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定 量多道加液器,使加液過(guò)程迅速完成。
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