RT-PCR服務(wù)，逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)服務(wù)

逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)服務(wù)

世聯(lián)博研生命科學(xué)服務(wù)中心為客戶提供you質(zhì)的逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)服務(wù)。

逆轉(zhuǎn)錄PCR的指數(shù)擴(kuò)增是一種很靈敏的技術(shù)，可以檢測很低拷貝數(shù)的RNA。逆轉(zhuǎn)錄PCR廣泛應(yīng)用于遺傳病的診斷，并且可以用于定量監(jiān)測某種RNA的含量。

逆轉(zhuǎn)錄PCR的關(guān)鍵步驟在是RNA的反轉(zhuǎn)錄，要求RNA模版為完整的且不含DNA、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。RT-PCR有時(shí)候也會(huì)指代實(shí)時(shí)PCR(real-time PCR)。為了與逆轉(zhuǎn)錄PCR相區(qū)別，通常被寫作“定量PCR”(quantitative PCR，QT-PCR)或者RTQ-PCR(real-time quantitative PCR)。

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)

1.當(dāng)標(biāo)本個(gè)數(shù)>5個(gè)時(shí)，收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)為每個(gè)標(biāo)本每個(gè)指標(biāo)80元，內(nèi)參免費(fèi)；

2.當(dāng)標(biāo)本個(gè)數(shù)≤5個(gè)時(shí)，收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)按照5個(gè)標(biāo)本計(jì)算；計(jì)算方法如上；

3.標(biāo)本大于50個(gè)以上并且指標(biāo)較多時(shí)，收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)可另行商議。

A.RNA抽提(總RNA提取)：20份以下每份樣品80元，超過20份每份60元，低收費(fèi)1200元。

B.RT-PCR:20份以下每份樣品80元，超過20份每份60元，低收費(fèi)1200元。

C.PCR:20份以下每份樣品50元，超過20份每份35元，低收費(fèi)1000元。

服務(wù)周期

1~2周，根據(jù)樣品情況而定。

客戶須知（對材料的要求、注意事項(xiàng)）

1.客戶須在實(shí)驗(yàn)開始前確保其提供材料的數(shù)量和質(zhì)量，并提供相關(guān)信息。

A.客戶需提供盡量多的新鮮樣品（組織：100-200 mg或直接提供純化好的總RNA 5 μg/樣本）。動(dòng)物組織離體后必須立即用生理鹽水清洗，時(shí)間不超過10min，馬上用一次性塑料手套或鋁箔包好凍入液氮中，-70℃低溫冰箱保存；植物組織必須保證新鮮，用液氮速凍后放入-70℃低溫冰箱保存；細(xì)胞為培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。同時(shí)請避免樣品儲(chǔ)存時(shí)間過長，有融化或者溶解。

B.可直接提供Total RNA，要保證沒有降解，要求總RNA＞500μg，濃度＞1μg/μl；mRNA＞3 μg，濃度＞50 ng/μl；OD260/OD280值≥1.8，以我公司電泳膠圖、紫外分析儀定量檢測為準(zhǔn)。引物長度及G、C含量，引物若為干粉，請?zhí)峁┮�物的�?zhǔn)確量；若為稀釋液，請?zhí)峁┮�物的終濃度（每個(gè)反應(yīng)所需的引物滿足以下要求：濃度≥10pm/ml，體積≥10ml）。（引物也可由我公司提供，費(fèi)用另計(jì)。）

C.建議由我方提取RNA；如果客戶提供RNA樣品，由樣品質(zhì)量產(chǎn)生的任何問題，其損失和責(zé)任應(yīng)由樣品提供方承擔(dān)。

2.本公司在收到客戶提供的研究材料后的弟二個(gè)工作日起開始實(shí)驗(yàn)。

3.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，本公司將結(jié)果及時(shí)發(fā)給客戶：

A.cDNA

B. PCR產(chǎn)物

C.實(shí)驗(yàn)報(bào)告（包括實(shí)驗(yàn)方法、照片等）。

服務(wù)程序

1.可在我公司網(wǎng)站內(nèi)直接填寫《RT-PCR服務(wù)訂單》發(fā)至我公司郵箱。

2.可下載訂單，填寫完成后，用傳真的形式發(fā)到我公司。

3.可電話聯(lián)系詳談?dòng)嘘P(guān)具體要求和服務(wù)內(nèi)容。

4.簽訂《RT-PCR服務(wù)合同》，預(yù)付實(shí)驗(yàn)總費(fèi)用的50%作為實(shí)驗(yàn)預(yù)付款。

5.寄送：委托單位的試驗(yàn)材料和試劑等均須采用te快專遞形式郵寄，有低溫要求的、固定要求的，按低溫保存、固定防碎方法運(yùn)輸，以確保實(shí)驗(yàn)物品的安可靠。

6.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，本公司將結(jié)果及時(shí)發(fā)給客戶，同時(shí)根據(jù)客戶要求處理相關(guān)材料。

7.客戶應(yīng)對所提供的材料及信息負(fù)責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實(shí)驗(yàn)延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶承擔(dān)。

服務(wù)咨詢及技術(shù)支持

·電話:

·Email:SLBY800@163.COM

服務(wù)項(xiàng)目簡介

逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的原理：提取組織或細(xì)胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采取Oligo(dT)或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA。再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，從而獲得目的基因或檢測基因表達(dá)。該技術(shù)通過循環(huán)擴(kuò)增，提高了其檢測的靈敏度。主要用于分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構(gòu)建RNA高效轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)等。

技術(shù)步驟

應(yīng)用實(shí)例

FAQ（Frequently Asked Questions）

1. 逆轉(zhuǎn)錄PCR可以用于定量檢測基因的表達(dá)水平嗎？如果可以，如何檢測分析？

逆轉(zhuǎn)錄PCR可以用于半定量檢測基因的表達(dá)水平，半定量逆轉(zhuǎn)錄PCR是一種簡捷、快速、te異的定量RNA 測定方法, 通過mRNA 反轉(zhuǎn)錄成cDNA , 再進(jìn)行PCR 擴(kuò)增, 擴(kuò)增產(chǎn)物以指數(shù)形式增長, 通過測定PCR 產(chǎn)物的數(shù)量, 就可以推測各樣品中te異mRNA 的相對含量。逆轉(zhuǎn)錄PCR服務(wù)可以用于基因調(diào)取嗎？

在進(jìn)行目的蛋白的表達(dá)、構(gòu)建表達(dá)載體等實(shí)驗(yàn)時(shí)，通常需要獲得一段目的基因。我們可以根據(jù)您提供的已知參考序列（NCBI上已發(fā)表)，以基因組DNA或總RNA為模板，獲取您所需要的某個(gè)區(qū)域的一段基因。

2. 怎樣對合成DNA/RNA制品進(jìn)行定量

由于核酸在260 nm附近有強(qiáng)吸收，因此常根據(jù)此性質(zhì)，用紫外分光光度計(jì)測定核酸溶液在260 nm的吸光度值，據(jù)此對核酸進(jìn)行定量，用OD值來表示。