為了探索高糖(high glucose，HG)促進(jìn)體外培養(yǎng)的人皮膚成纖維細(xì)胞(human dermal fibroblasts，HDFs)的衰老條件， 天津醫(yī)科大學(xué)邊曉瑋 張翠萍 李炳旻等人分離人包皮組織的HDFs，建立高糖老化模型；觀察胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體(exosomes，Exos)對(duì)高糖培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞增殖、遷移及衰老的影響。實(shí)驗(yàn)分為3組：正常對(duì)照組(5.5 mmol/L葡萄糖)、HG1組(26 mmol/L葡萄糖)、HG2組(35 mmol/L葡萄糖)。CCK-8試劑盒檢測(cè)各組細(xì)胞在1、3、5、7 d的增殖情況；各組培養(yǎng)7 d后進(jìn)行劃痕實(shí)驗(yàn)，觀察各組HDFs在24 h內(nèi)的遷移率；2′，7′二氯熒光素二醋酸(DCFH)法檢測(cè)各組培養(yǎng)7 d后細(xì)胞內(nèi)活性氧簇(ROS)水平；細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測(cè)各組培養(yǎng)7 d后β-半乳糖苷酶活性。體外培養(yǎng)胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞(placenta mesenchymal stem cells，PMSCs)，差速高速離心法分離Exos。將上述培養(yǎng)的HDFs分為3組：HG2組(35 mmol/L葡萄糖)、HG2+低濃度Exos(5μg/mL)組、HG2+高濃度Exos(50μg/mL)組，培養(yǎng)3 d后，檢測(cè)細(xì)胞增殖情況、遷移率、ROS水平和β-半乳糖苷酶活性；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期；Western blot分析衰老相關(guān)蛋白p53和p21表達(dá)情況。

結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，HG1和HG2組培養(yǎng)的HDFs增殖、遷移能力明顯下降(P<0.01)，ROS水平顯著升高(P<0.01)，β-半乳糖苷酶活性顯著增加(P<0.01)，而且各指標(biāo)尤其以HG2組變化最為明顯；Exos實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：高濃度Exos明顯促進(jìn)高糖培養(yǎng)HDFs的增殖和遷移(P<0.01)，顯著降低細(xì)胞內(nèi)的ROS水平和β-半乳糖苷酶活性(P<0.01)，同時(shí)使細(xì)胞內(nèi)p53和p21蛋白的表達(dá)水平顯著下降(P<0.01)，而低濃度Exos無明顯效果。

胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞來源的Exos促進(jìn)高糖培養(yǎng)的HDFs增殖、遷移，緩解細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷和衰老狀態(tài)，其機(jī)制可能與衰老相關(guān)蛋白p53和p21表達(dá)下調(diào)有關(guān)。(生物谷Bioon.com）

小編推薦會(huì)議  2021（第五屆）外泌體與疾病研討會(huì)

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